【摘要】 近年來， 細胞治療已成爲臨牀治療乙型病毒性肝炎（乙型肝炎）的一種重要手段， 細胞因子誘導的殺傷細胞（CIK）作爲一種新型、高效、廣譜的免疫活性細胞， 在乙型肝炎治療中得到廣泛應用。本文就CIK的生物學特性、製備和臨牀應用做一綜述。
【關鍵詞】 殺傷細胞;細胞因子誘導;乙型病毒性肝炎
我國屬乙型肝炎高地方性流行區， 每年死於肝硬化和肝癌等乙型肝炎相關疾病者達30餘萬例。乙型肝炎已成爲嚴重危害我國人民健康的重要因素。目前對乙型肝炎的治療缺少有效手段。最有效的是應用干擾素、拉米夫定等藥物抗病毒治療， 但其治療反應率不高， 效果並不理想。細胞免疫治療由於其安全、不良反應少、抗病毒活性高、增強機體免疫等特點成爲治療乙型肝炎的又一手段[1]。
細胞因子誘導的殺傷細胞（cytokine induced killers， CIK）是外周血單個核細胞經多種細胞因子刺激產生的一羣異質細胞， 兼有T 細胞強大的抗病毒活性與自然殺傷細胞（NK細胞）的非主要組織相容性複合物（MHC）限制性免疫殺瘤和抗病毒特點[2]。CIK還能分泌多種細胞因子， 提高機體的.免疫能力， 增強抗病毒能力， 在細胞治療中前景越來越廣闊。本文就近年來在CIK治療乙型肝炎方面的相關研究作簡要綜述。
1、CIK細胞的生物學特性
CIK細胞是人外周血單個核細胞在體外經多種細胞因子如干擾素（IFN）、CD3單抗和白細胞介素—2（IL—2）等刺激後生成的一羣異質細胞。Kim等[3]研究顯示， 外周血CIK細胞含量很少， 細胞因子IL—2可促進其增殖。流式細胞儀檢測CIK高表達CD3CD8和CD3CD56， 提示其具有T細胞的功能又具有NK細胞的功能。殺傷活性試驗顯示[4]， CIK能對多種腫瘤細胞如人紅白血病細胞株K562、肝癌細胞株HepG2和人肺癌細胞株A549等起到殺傷作用。目前已有大量臨牀研究報道CIK應用於腫瘤治療[5， 6]。
2、CIK細胞的製備和擴增培養
CIK細胞來源於外周血單個核細胞， 常規培養方法是應用IFN—γ、CD3單抗和IL—2刺激使其大量增殖， IFN—γ能增加CIK的細胞毒活性， CD3單抗和IL—2能使T細胞活化並增殖。喬林邦等[7]在常規培養中加入重組人粒細胞集落刺激因子（rhG—CSF）可抑制CD3+CD4+T細胞， 增加CD3+CD56+T細胞生成。劉軍權等[8]在常規培養中加入CD28 mAb、IL—15和IL—21， 結果顯示在CIK細胞培養體系中增加CD28 mAb、IL—15和IL—21， 細胞增殖能力增加， 細胞分泌IFN—Y量顯著增高， 經不同刺激因子活化的CIK細胞對A549、MFC—7和HMEl細胞殺傷活性有明顯增強。徐本玲等[9]在常規培養中加入重組人纖維連接蛋白（Retro Nectin， RN）結果顯示用RN誘導的CIK細胞增殖速度快， 殺傷腫瘤細胞活性高， 細胞因子IFN—γ和腫瘤壞死因子—α（TNF—α）的分泌量增多， 在無血清培養條件下可在短期內誘匯出大量的具有生物學活性的CIK細胞。
3、CIK細胞應用於治療乙型肝炎的臨牀應用
目前細胞免疫治療乙型肝炎病毒（HBV）感染已取得一定的療效。韓際奧等[10]對95例慢性乙型肝炎（CHB）患者隨機分組， 自體靜脈回輸DC/CIK， 患者治療後3、6個月時病毒載量顯著下降， 治療後1個月後， 患者血清IL—12水平顯著高， 提示細胞治療對HBV有一定的抑制作用。蘇海濱等[11]研究顯示， 應用CIK細胞治療慢性乙型肝炎患者， 隨訪52周後HBV—DNA顯著下降。陳作嚴等[12]將50例慢性乙肝患者隨機分成兩組。治療組30例， 接受CIK 細胞治療一個療程， 回輸細胞數爲（1。0～3。2）×1010， 對照組採用常規藥物治療。結果顯示30例治療組患者經CIK治療後， CD3+、CD4+、CD8+的表達和細胞增殖倍數均明顯增加。在近期的療效觀察中， 乙肝患者血清中HBV—DNA含量明顯下降， 完全應答率>50%。陳宛麗等[13]應用CIK細胞治療慢性乙型肝炎， CIK組12例和對照干擾素組21例， 療程結束6個月後， 患者的谷丙轉氨酶（ALT）及HBV—DNA復常率、HBeAg轉陰率及HBeAb陽轉率均高於干擾素治療組患者。陳劍等[14]收集72例肝鬱脾虛型HBeAg陽性慢性乙型肝炎患者， 其中42例爲CIK細胞治療組， 30例爲口服恩替卡韋（ETV）對照組， 研究表明CIK細胞治療肝鬱脾虛型慢性乙型肝炎患者在24周內是安全有效的， 其抑制HBV—DNA作用較服恩替卡韋差， 但改善肝功能的作用與恩替卡韋相當， 且HBeAg陰轉率及血清轉換率明顯優於對照組。韓際奧等[15]HBsAg致敏的DC—CIK具有較好抗病毒治療效果， 治療結束24周後患者病毒學應答總有效率可達63。6%， 其中4例HBV—DNA轉陰， 轉陰率12。1%。同時治療後慢性乙型肝炎患者HBsAg濃度及ALT水平亦有所下降。
綜上所述， CIK治療乙型肝炎能夠增加患者的免疫功能， 提高抗病毒能力， 是治療乙型肝炎感染的又一重要手段。
4、存在的問題與展望
雖然目前有關CIK細胞應用於治療乙型肝炎研究結果令人鼓舞， 但在很多問題上仍然還存在頗多爭議， 還有許多問題需要解決。如CIK培養用何種培養基、細胞移植數量、移植途徑、移植時機、安全性以及不良反應症等仍需要進一步研究證實。
綜上所述， 急需建立CIK的細胞治療標準化方案來解決這些問題， 相信隨着研究的深入， CIK細胞治療標準化方案的建立、CIK在細胞治療的應用前景會越來越廣闊。
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