【關鍵詞】 無菌 微生物 檢驗
【Abstract】 The article make the exploration about a few factors including human, facilities, environment that should influence the examination about the food microorganism，to ensure the accuracy of the data of the examination of the food microbiological.
【Key words】 Asepsis Microorganism Examination
食品微生物檢驗的目的就是要爲生產出安全、衛生、符合產品標準的食品提供科學依據。因而對食品微生物進行檢驗至關重要。本人就如何保證食品微生物數據的準確性應注意的幾點因素談談自己的認識。
1 人的因素
爲了保證微生物檢驗的高質量，要求檢驗人員的知識結構、專業技術能力和檢驗的高水平。微生物檢驗工作人員不僅要有專業知識和熟練的技術，而且還必須具備對工作的高度責任感和實事求是的科學工作作風。確保實驗室人員得到及時培訓及不斷更新知識，學習和掌握新理論、新技術和新方法。儲存技術人員有關資歷、培訓、技能和精力等技術業績檔案。
2 設施、環境
實驗室應具有進行微生物檢驗適宜充分的設施條件，包括檢測設施(專用於微生物檢測和相關活動)及輔助設施(大門、走廊、管理區、樣品區、清潔間)特殊的設備要在特殊的環境下放置和操作。
2.1無菌實驗室的建設應符合GB19489的規定，符合無迴路的原則。設有人流和物流通道。
2.2 在時問和空間上有效隔離各種檢測活動。
2.3 爲保證檢測樣品的完整性，操作時應按照規定的程序並採取預處理措施。
2.4 無菌區(檢驗區)。
(1)紫外線消毒：在室溫下，220V，30W紫外燈下方垂直位置 lm處的253.7nm紫外線輻射強度應≥70μW／cm2，低於此值時應更換，適當數量紫外燈，確保平均每立方米應不少於1.5W。紫外線消毒時無菌室內應保證清潔乾燥在無人條件下可採取紫外線消毒，作用時間爲30min。人員在關閉紫外燈至少30min後方可入內作業。
(2)臭氧消毒：封閉無菌室內，無人條件下，採用20mg／m3濃度的臭氧作用時間應≥30min，消毒後室內臭氧濃度≤0.2mg,／m2時方可人內作業。
(3)無菌室空氣滅菌效果驗證方法(沉降法)：一般情況下無菌室面積≤30m2時從所設定的一條對角線上選取3點，即中心l點、兩端各距牆1米處各取一點；無菌室面積≥30m2時選取東、南、西、北、中點均距牆lm各取一點。
在所選位點，將平板(90mm2的)距地面80釐米處開蓋暴露l5min，置於36±1℃，恆溫培養48h±lh，確認平板上的菌落數，如大於所設定的風險值應分析原因並採取適當措施。
2.5 透過以下途徑減少污染：
(1)表面光滑的牆、天花板、地面和桌椅。(2)地面、牆壁、天花板連接處應有弧，地面應防滑。(3)當進行檢測時應關閉門窗。(4)換氣系統應有空氣過濾裝置。(5)獨立的洗手池。(6)固定設備和室內裝置的木質表面應密閉包裹。(7)不使用粗糙而裸露的木塊。(8)檢驗室內不得堆放雜物。
3 設備及藥品配置
3.1培養箱、水浴箱、乾熱滅菌箱和高壓滅菌鍋：
①首次安裝時要對溫度的穩定性和一致性進行校準。②記錄培養箱、水浴鍋和乾熱滅菌箱的溫度穩定性達到平衡所需的時間。③每次經檢定合格後方能使用，並對這些設備的執行溫度進行記錄。④定期清潔和消毒內外壁。⑤高壓滅菌鍋的時間和溫度指示的準確度應滿足要求，不能僅依靠高壓鍋的壓力錶測定時間，應使用感應器控制和監控運轉循環情況。 3.2藥品配置：
①培養基通常採用高壓溼熱滅菌法，121℃滅菌15min，特殊培養基按使用者的`特殊要求進行滅菌(如含糖培養基ll5℃滅菌20min。②部分培養基(如嗜鹽瓊脂培養基、膽硫乳培養基等)，只能煮沸滅菌。③對熱敏感的培養基或添加物應採用膜過濾方法進行過濾除菌。
3.3器具
①溼熱滅菌：採用高壓滅菌器121℃滅菌20min，適用於玻璃器皿、移液器吸頭、塑料瓶等。按照GB15981的規定評價高壓滅菌器的殺菌效果。在高壓滅菌時注意滅菌物品不要相互擠壓過緊，以保證蒸汽通暢，使所有物品的溫度均上升，才能達到徹底滅菌的目的。②乾熱滅菌：採用乾燥箱滅菌160℃滅菌2h，180℃滅菌1h適用於玻璃器皿、不鏽鋼器具等。
4 樣品的採集、運輸和儲存
樣品的採集必須具有代表性，要考慮到各種影響樣品質量的因素，防止樣品受到外源性污染，防止樣品變質和細菌生長。採樣必須在無菌操作下進行，所謂無菌操作是指杜絕任何病原性或非病原性微生物進入樣品。採樣用具及包裝物必須是滅菌的。冷凍食品保持冷凍狀態；非冷凍食品需保持在(0～5)℃中儲存。樣品的運輸和儲存應避免日光照射，必須防止外來物的污染。樣品從採樣點送達實驗室應越快越好，一般不超過3h，實驗室檢測工作應儘快進行，長時間冷凍可導致微生物死亡，反覆冷凍和融化對微生物也有很大影響必須儘快進行檢測。
5 操作
(1)操作人員必須牢固樹立無菌觀念，整個操作均要求無菌操作，儘量靠近火焰，動作要迅速，從微生物的分離、純化到接種，手法規範。嚴格按照GB/T4789食品微生物檢驗標準中的操作規程進行檢驗。