全部作者: | 劉素梅 趙淑萍 王澤華 戴淑真 |
第1作者單位: | 青島大學醫學院附屬醫院婦產科 |
論文摘要: | 目的 探討血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)的小分子干擾RNA(siRNA)對培養的人宮頸癌Hela細胞增殖的影響,檢測VEGF基因及其蛋白表達的情況,瞭解VEGF基因在宮頸癌發生、發展中的`作用。方法 根據siRNA序列設計原則,設計併合成針對VEGF165序列特異性小干擾RNA(siRNA)及陰性對照siRNA,轉染人宮頸癌Hela細胞。篩選出最有效的siRNA干擾序列後,用實時熒光定量RT-PCR方法檢測轉染後Hela細胞中VEGF mRNA的表達,VEGF mRNA的表達以PCR循環數閾值(Ct值)表示,12h開始觀察和檢測所產生RNA干擾的效果。Western Blot 方法檢測VEGF-165蛋白的表達,MTT及細胞計數法檢測siRNA轉染對培養細胞生長增殖的影響。結果 VEGF siRNA轉染Hela細胞後,與對照組相比VEGF mRNA表達水平明顯下降,VEGF蛋白表達明顯減弱,差異有統計學意義(P<0.05)。實驗組Hela細胞生長較對照組明顯受到抑制(P<0.05),從形態學的角度,實驗組的細胞明顯變小、皺縮、變圓並開始脫落,而無關序列siRNA 及對照則無明顯改變(P>0.05),隨着時間延長,效果越明顯,72 h干擾效率最高。本實驗重複性強,同樣的實驗重複3次結果1致。結論 VEGFsiRNA 可以有效抑制宮頸癌Hela細胞VEGF mRNA及其蛋白的表達水平,抑制細胞生長,表明VEGF基因在宮頸癌的發生、發展中具有重要作用。 |
關鍵詞: | RNA,小分子干擾 ;內皮生長因子;熒光定量RT-PCR;基因,抑制,腫瘤;宮頸腫瘤 遠程下載 論文(免費PDF論文全文) |
發表日期: | 2007年06月13日 |
同行評議: | (暫時沒有) |
綜合評價: | (暫時沒有) |
修改稿: |
RNA干擾對血管內皮生長因子在人宮頸癌細胞系Hela細胞中表達及細
學問君
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