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毛畢吸蟲成蟲分離方法的研究初報

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毛畢吸蟲成蟲分離方法的研究初報  摘 要 目的 爲提高毛畢吸蟲成蟲的收集率。方法 對家鴨行離體或在體肝靜脈逆行灌注收集肝內和門靜脈內成蟲;同時對家鴨灌注降主動脈,以收集肝內、門靜脈內和腸繫膜靜脈的成蟲。結果 應用上述方法可收集到大量活的無損傷的成蟲。結論 灌注法優於解剖法,且簡便、快捷,實用性強。

PRELIMIARY STUDY ON THE METHODS OF SEPARATING

毛畢吸蟲成蟲分離方法的研究初報

ABSTRACT Aim To improve the collecting rate of the adult worms of ods The adult worms in vena portae and hepaticae interna were collected by the methods of exsomatization and retrograde pouring in vena of livers of adult worms in livers,vena portae and vena mesenterica of ducks were collected by the method of pouring aorta lts A lot of non-traumatic living adult worms and non-traumat could be collected by these collecting rate of the pouring was significantly higher than that of other methords(p<0.05)lusions The method of pouring was more simple,direct,practical and was better than that of dissection.

KEY WORDS Trichobiharzia adult worm pouring collecting method

毛畢屬(Trichobilharzia)吸蟲爲鳥類血吸蟲,其尾蚴可侵襲人體引起變態反應性皮炎,該屬吸蟲宿主較多,家鴨是毛畢屬吸蟲主要的終宿主之一[1~10]。從家鴨體內分離出成蟲,是研究其形態、結構並進行分類的重要基礎。作者在淮河水系毛畢屬吸蟲研究的過程中,對毛畢吸蟲成蟲的分離方法進行了初步研究,取得了較爲滿意的結果,現報道如下。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 病鴨 用毛畢屬吸蟲尾蚴(50條)人工感染的、並在院動物房內飼養30天以上的雛鴨(爲當地居民孵化的家鴨);購自當地居民(漁民及農民)於毛畢吸蟲流行水域內放養1年以上的陽性家鴨。

1.1.2 藥品器材 肝素(Ehter.批號:930407,上海浦江應用生物化學研究所。)乙醚(Diethylether,批號:960423,宜興市第二化學試劑廠)、注射器、9號注射針頭、吊瓶、解剖針、橡皮導管、玻璃導管、手術刀、剪等。

1.2 方法

1.2.1 肝門靜脈、腸繫膜靜脈解剖法 將病鴨(其糞便經毛蚴孵化爲陽性的家鴨)固定在解剖臺上,用乙醚麻醉後,剖開胸腹部,將肝門靜脈和肝靜脈結紮,用眼科剪、解剖針和“0”號毛筆剖檢肝門靜脈和腸繫膜靜脈分離成蟲。即從較細的腸繫膜靜脈開始,分段以解剖針刺破靜脈,並以解剖針從靜脈遠端驅趕血液(成蟲)從刺破處流出,用毛筆輕取流出血液至含有生理鹽水的平皿中,用生理鹽水反覆清洗換水,直至蟲體被洗淨爲止。最後在解剖鏡下收集成蟲。

1.2.2 在體肝臟灌注法 將病鴨(其糞便經毛蚴孵化爲陽性的家鴨)固定在兔解剖臺上,在翅根部靜脈注射2ml肝素鈉(12500U),隨即用乙醚麻醉後剖開胸腹部,暴露內臟(操作中應避免劃傷心臟和肝臟)。接着在肝靜脈出口遠端和門靜脈起始端各作一切口,分別插入匯入管和匯出管(上述兩管可由普通玻璃吸管替代,其長短、粗細根據鴨子的`大小與靜脈的粗細選用)。將含有生理鹽水的500ml吊瓶,置於2.5m高處,透過輸液皮條與匯入管相連,接通生理鹽水,生理鹽水和成蟲一起即可從門靜脈匯出管口流出(擡高匯入端解剖臺效果尤佳)。

當流出液中含有較多組織液和血液時,可在量杯中換水沉澱幾次,每次5min。若流出液較清晰,立即吸入小培養皿內,在解剖鏡下或用肉眼直接分檢。

1.2.3 離體肝臟灌注法 將病鴨(其糞便經毛蚴孵化爲陽性的家鴨)固定在解剖臺上,在翅膀根部注射2ml肝素鈉。隨即用乙醚麻醉後解剖,暴露內臟。用止血鉗或縫合線分別夾(扎)住肝靜脈和門靜脈起始端,仔細分離肝臟,並移至平皿內。然後將連有生理鹽水吊瓶的吸管慢慢插入肝靜脈內,接通生理鹽水進行灌注,將門靜脈流出液倒入300ml量杯內,沉澱,換水2次,緩慢棄去上液,沉澱液倒入小平皿內,在解剖鏡下或手持放大鏡用肉眼直接分檢。