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HPLC法測定獨子藤中雷公藤紅素的含量

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【摘要】  目的建立高效液相色譜法測定獨子藤中雷公藤紅素的含量,爲雷公藤紅素的藥用植物資源開發提供依據。方法 採用Supelco Discovery C18柱(25 cm×4.6 mm,5 μm),流動相爲甲醇-5%(體積分數)H3PO4水溶液(體積比80∶20),流速爲1.0 mL·min-1,檢測波長爲426 nm。結果 雷公藤紅素在40~200 μg·mL-1範圍內與峯面積呈良好線性關係(r=0.999 1)。獨子藤中雷公藤紅素的平均質量分數爲0.055 5%,雷公藤紅素的平均回收率爲97.6%,RSD=1.78% (n=6)。結論 該方法簡便、準確、靈敏度高、重現性好,可用於獨子藤中雷公藤紅素的含量測定;獨子藤中雷公藤紅素含量較高,可作爲雷公藤紅素的資源植物加以開發利用。

HPLC法測定獨子藤中雷公藤紅素的含量

【關鍵詞】  獨子藤;雷公藤紅素;高效液相色譜法;成分分析

Abstract:ObjectiveTo determine the content of tripterine in Celastrus monospermus Roxb by HPLC for developing the medicinal resources of ods An external standard method by HPLC with Discovery C18 column (25 cm×4.6 mm,5 μm) was mobile phase was consisted of methanol-5%(φ) phosphoric acid solution (80︰20) (ξ)at the flow rate of 1.0 mL· detection wavelength was 426 lts It showed good linearity in the range of 40-200 μg·mL-1 (r=0.999 1) content of tripterine in Celastrus monospermus Roxb was 0.055 5%,and the average recovery rate of celastrol was 97.6%(RSD=1.78%,n=6)lusion The method is simple and accurate,sensitive and reproducible and can be used in the quality control of Celastrus monospermus content of tripterine in Celastrus monospermus Roxb was high,which can be exploided as the herbal resource.

Key words:Celastrus monospermus Roxb; tripterine; HPLC; assay

獨子藤(Celastrus monospermus Roxb.)爲衛矛科南蛇藤屬植物,分佈於我國福建、廣東、雲南、貴州、廣西等省區及越南和印度等地,主要生長於海拔1 000 m以上的林帶中[1]。研究表明獨子藤的化學成分主要爲生物鹼和木栓烷型三萜類化合物,其中木栓烷型三萜類化學成分對風溼病、白血病和麪板病均有較好療效[2]。雷公藤紅素爲木栓烷型三萜類化合物,是雷公藤片、雷公藤多苷片等治療類風溼病製劑的有效成分之一,主要來源於中藥雷公藤的根皮,具有抗炎、免疫抑制及抗腫瘤等多種藥理活性[3]。中美科學家於2006年聯合發現雷公藤紅素的抗癌新機制[4],引發了雷公藤紅素抗癌活性研究的熱潮。我們在獨子藤的化學成分研究中發現該植物根中富含雷公藤紅素,是一種潛在的雷公藤紅素植物資源,具有重要開發價值。但至今尚未見有關獨子藤中雷公藤紅素含量測定的文獻報道。本文建立了獨子藤中雷公藤紅素的含量測定方法,對合理開發獨子藤植物資源、促進雷公藤紅素的深入研究,均具有重要意義。

1儀器與試藥

1.1儀器

Shimadzu LC-10AT型高效液相色譜儀(日本島津公司),SPD-10AT型紫外-可見檢測器(日本島津公司),HW-2000色譜工作站;Millipore溶液過濾器;Millipore 0.45 μm濾膜;AY120電子分析天平(Shimadzu公司);RE-52A旋轉蒸發儀(上海亞榮生化儀器廠)。

1.2試藥

雷公藤紅素對照品(自制,經HPLC法測定純度≥98%);獨子藤於2008年10月採自廣東省陽春市,由廣東藥學院李書淵教授鑑定爲獨子藤Celastrus monospermus Roxb.;硅膠(柱層析硅膠,青島海洋化工有限公司);甲醇爲色譜純;水爲超純水;其餘試劑均爲分析純。

2方法與結果

2.1色譜條件