關鍵詞： 柴葛 粉葛 葛根素 總黃酮 高效液相色譜
葛根爲豆科植物柴葛Pueraria lobata (Willd. )Ohwi 和甘葛藤Pueraria thomsonii Bent h. 的乾燥根，前者習稱柴葛，甘葛藤習稱“粉葛”［1］，始載於《神農本草經》，味甘、辛，性平，具有增加腦及冠狀動脈血流量、降低血管阻力、收縮平滑肌、降血糖及解熱等多種功效［2］。民間用於治療傷寒、溫熱頭痛、煩熱消渴等症，也是中醫常用的祛風解毒藥。現代研究表明，葛根含葛根異黃酮，主要爲葛根素(perarin) 、大豆苷(daidzin) 、大豆苷元(daidzein) 3種活性成分，其中葛根素是本屬的特徵成分，也是主要成分，爲了對葛根進行有效的質量控制，本實驗以葛根素爲指標，以柴葛、粉葛藥材爲對象，建立了高效液相色譜法測定其葛根素的含量方法，並採用紫外分光光度法對其中的總黃酮進行了含量測定，爲柴葛、粉葛的'藥材鑑定提供參考方法。
1 儀器與材料
1.1 儀器美國 Waters 公司600-2487高效液相色譜儀,Millenium數據處理系統;Waters2487紫外檢測器；島津UV-2401PC型紫外分光光度計；島津AY120型萬分之一電子分析天平；SB3200型超聲清洗器。
1.2 材料葛根素對照品：中國藥品生物製品檢定所；甲醇爲色譜純；水爲重蒸餾超純水；其它試劑均爲分析純。柴葛產於安徽嶽西，粉葛產於廣西。
2 方法與結果
2.1 HPLC法測定葛根中葛根素的含量
2.1.1 色譜條件色譜柱：Zorbax XDB-C18（4. 6 mm ×250 mm , 5 μm)；流動相∶甲醇-水（32∶68）；流速1 ml/min；檢測波長250 nm；柱溫22℃；進樣體積10μl。理論板數按葛根素峯計算不低於5000。在該色譜條件下，樣品中的葛根素與其它峯均能達到基線分離，保留時間在14.3 min左右，對照品與樣品的色譜圖見圖1。
圖1 對照品Ⅰ、柴葛索氏提取Ⅱ、粉葛索氏提取Ⅲ的HPLC色譜圖（略）
2.1.2 對照品溶液的製備精密稱取葛根素對照品5.1mg，甲醇定容於25 ml量瓶。分別移取0.5，1.0，2.0，2.5 ml於5 ml量瓶，水定容，與原液共同作爲HPLC用對照品溶液。
2.1.3 供試品溶液的製備
熱迴流提取法：精密稱取柴葛、粉葛粉末（過50目篩）各0.1 g，置具塞錐形瓶中，精密加入30%乙醇50 ml，稱重。迴流提取30 min，放冷，稱重並以30%乙醇補足減失重量，搖勻過濾，取續濾液爲供試品，待測。
索氏提取法：稱取柴葛、粉葛粉末各0.5 g, 精密稱定，以甲醇爲提取劑提取4h，過濾，濃縮提取液並用甲醇定容於10 ml量瓶。超聲處理30min，取上清液以水定容於10 ml量瓶，待測。
2.1.4 線性關係考察取對照品溶液，按照“2.1.1”色譜條件進樣10 μl，葛根素進樣量X(μg)爲橫座標，以峯面積Y爲縱座標繪製標準曲線，其迴歸方程爲：Y= 3.507 6×106X 3.274 5×104，r = 0.999 9。結果表明，葛根素進樣量在0.204～2.04μg範圍內與峯面積線性關係良好，可用外標兩點法計算含量。
2.1.5 精密度考察在“2.1.1”項色譜條件下，吸取同一對照品溶液10 μl，連續進樣5次，測得峯面積，RSD=0.8%，表明進樣與峯面積積分的精密度良好。
2.1.6 重複性考察取同一批柴葛、粉葛樣品5份，按“2.1.3”項下的方法制樣後，以“2.1.1”項色譜條件進樣10 μl，測定葛根素的峯面積，按外標法計算含量，RSD=2.8%，表明分析方法重複性良好。